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为什么FITC微球不适合做免疫层析卡?

      异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate, FITC),最大吸收光波长为490~495nm,最大发射光波长为525~530nm,是最常见的荧光化合物,信号足够强,使用也最为普遍,但为什么FITC荧光球就不能用于免疫层析卡呢?

       首先,FITC荧光容易漂白/淬灭,寿命短,限制了产品的稳定性及保质期。
       其次,FITC是一种外标荧光染料,只能涂在微球表面。外标会影响微球表面的功能基团,从而影响后面微球与抗体/蛋白的偶联。
       最后,研制荧光免疫层析卡的目的之一是希望能提供定量或半定量检测结果。FITC作为一种pH敏感的荧光物质,即其发光效率受环境pH的影响比较大。因此检测标本、或缓冲条件有变化,就会影响读数结果,达不到定量要求。
       类似的还有Alexa Fluor 647等外标荧光染料。

       正是因为FITC的以上特点,不少厂家都推出了FITC的替代产品,如Polysciences的YG荧光,Bangslabs的Dragon Green。当然自从铕荧光球出现后,就很少有厂家再尝试用其它荧光微球做层析卡了。
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